Download Recombinant DNA Technology

‫به نام پروردگار‬
‫بیوتکنولوژی‬
‫فناوری ‪ DNA‬نوترکیب‬
‫قسمت اول‪:‬آشنایی‬
Recombinant DNA Technology
DNA is the genetic material of most
organisms (from bacteria to humans)
Plasmid
Chromosome: Most bacteria have one circular DNA chromosome ranging in size from 1,000 to
8,000 kilobase pairs.
Plasmid: Extrachromosomal genetic element also made of a circular DNA molecule.
Bacterial Genome: The collection of all of the genes present on the bacteria’s chromosome or its
extrachromosomal genetic elements.
DNA is the genetic material of most
organisms (from bacteria to humans)
Nucleotides are the building blocks
of DNA
Only in RNA,
not DNA
Deoxyribonucleic acid (DNA) is a long
double-stranded chain of nucleotides
• A, C, G, and T
• A always pairs with T.
• C always pairs with G
• The two strands of DNA
are in an ant parallel configuration
• Two complementary DNA strands
will separate when heated, and
will spontaneously pair together
again (hybridize) when cooled
DNA Double Helix
‫همسانه سازی ژن‬
‫ وارد کردن قطعه ای از ‪DNA‬حاوی ژن مورد مورد نظر به داخل یک‬‫مولکول ‪DNA‬دیگر که معموالً حلقوی است وناقل همسانه سازی نامیده می‬
‫شود ودر نتیجه ایجاد یک مولکول ‪DNA‬ی نوترکیب ‪.‬‬
‫‪ -2‬وارد نمودن مولکول ‪DNA‬نوترکیب توسط عمل تراریخت سازی به درون‬
‫سلول میزبان ‪.‬‬
‫‪ -3‬تکثیر ناقل در داخل سلول میزبان در نتیجه تکثیر مولکول ‪DNA‬نوترکیب ‪.‬‬
‫‪ -4‬در نتیجه تکثیر سلول میزبان ‪ ،‬نسخه هایی از ‪DNA‬نوترکیب به داخل‬
‫سلولهای دختری رفته و تکثیر تصاعدی ناقل را باعث می شود ‪.‬‬
‫نکته‬
‫در ابتدا همسانه سازی برای تولید قطعات یکسان ژن ابدا شد‬
‫اما‬
‫گاهی همسانه سازی مستقیما جهت تولید پروتئین به کار برده‬
‫می شود‬
‫ناقل‌های‌همسانه‌سازی‌یا‌ژن‌کلونینگ‬
‫• وکتور(ناقل) دارای مجموعهای از خصوصیت است‪،‬‬
‫شامل‪:‬‬
‫‪ .1‬همانندسازی مستقل از سلول میزبان داشته باشد‪ .‬به این دلیل که بتواند‬
‫سریعتر از تقسیم سلولی تکثیر شود تا در نهایت نسخههای زیادی از آن‬
‫تولید شود‪.‬‬
‫‪ .2‬در هنگام تقسیم سلولی به سلولهای دختری ( سلولهای حاصل از تقسیم‬
‫) انتقال یابد‪.‬‬
‫‪ .3‬اندازهی کوچک در حدود ‪ 10‬کیلوباز داشته باشد‪ ،‬چراکه مولکولهای‬
‫بزرگتر از این مقدار ممکن است در طی مراحل تخلیص و کلونینگ خرد‬
‫شود و دستورزی آن نیز مشکل است‪.‬‬
‫ناقل‌های‌همسانه‌سازی‌یا‌ژن‌کلونینگ‬
‫•‬
‫•‬
‫•‬
‫•‬
‫•‬
‫•‬
‫•‬
‫پالسمیدها‬
‫فاژها‬
‫ویروس ها‬
‫کروموزوم مصنوعی باکتریایی‬
‫کروموزوم مصنوعی مخمر‬
‫وکتورهای بیانی‬
‫شاتل وکتورها‬
Viral gene
Recombinant DNA
Technology
Plasmid with foreign gene
Expression
plasmid
Transform into
bacterial cell
Plasmid
DNA
Bacterial cell
Plasmid DNA get
Amplified
Plasmid DNA
Purified
Ready to use
Nucleus
Plasmid
DNA
MHC-I
mRNA
Antigenic
Peptides
Antigenic Protein
‫موفق باشین•‬